期刊简介
《肿瘤研究与临床》由中华医学会、山西省肿瘤研究所、山西省肿瘤医院主办。本刊是肿瘤学专业学术期刊。办刊宗旨：开展学术交流，推广科技成果，反映发展动态，引导研究方向。基础与临床并举，普及与提高兼顾，努力推动我国恶性肿瘤防治事业的发展。服务对象：从事肿瘤研究及临床工作的中高级医务人员及其他关注本领域发展动态的相关人员。主要栏目：专论、专家讲坛、论著、短篇论著、调查报告、讲座、会议速递、综述、短篇及个案报告等。编委会由国内外100多位著名肿瘤学专家组成。为中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）、中国生物医学核心期刊、中国肿瘤学类核心期刊。被美国《化学文摘》（CA）等国际著名检索期刊及国内各大检索数据库收录。
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首页>肿瘤研究与临床杂志
- 杂志名称：肿瘤研究与临床杂志
- 主管单位：山西肿瘤防治通讯
- 主办单位：国家卫生健康委员会
- 国际刊号：11-5355/R
- 国内刊号：11-5355/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：剑桥科学文摘, 农业与生物科学研究中心文摘, 知网收录(中), 维普收录(中), 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
凋亡抑制因子Survivin基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达
王跃华；张青云
关键词：survivin, 凋亡抑制, Pichia pastoris表达, 肿瘤
摘要：目的克隆凋亡抑制因子Survivin基因,利用甲醇酵母Pichia pastoris真核表达系统表达Survivin蛋白.方法利用Survivin特异引物,通过PCR方法扩增人Survivin基因后进行测序,将序列正确的Survivin基因与分泌表达载体pPic9k重组,重组体酶切线性化后用电穿孔法转入酵母宿主菌GS115/His-中,以不同浓度G418/YPD平板筛选,经PCR扩增鉴定阳性克隆,再用含1%甲醇的培养基BMMY诱导表达蛋白,ELISA法检测表达产物.结果克隆的人Survivin基因与GenBank中的Survivin基因序列完全一致,无突变;构建了真核表达载体pPic9k-Survivin,并转入酵母菌GS115/His-后,筛选出了抗高浓度(4 mg/mL)G418的阳性克隆(GS115/His+)6个,并用PCR法进行了鉴定;Survivin的表达量与时间有关,48 h的表达量高.结论用Pichia pastoris真核表达系统表达Survivin蛋白的方法可行,若进一步优化条件,可大量表达Survivin蛋白,为进一步研究Survivin的生物学功能及其在肿瘤发生发展中的作用提供了重要的实验基础.
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